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              產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>非洲綠猴腎細胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7
               
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              產品名稱:
              非洲綠猴腎細胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7
              產品型號:
              產品報價:
              產品特點:
              非洲綠猴腎細胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7相關產品:
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                非洲綠猴腎細胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7的詳細資料:

              實驗要點及說明:
              1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
              2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
              3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
              4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
              5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
              公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

              產品名稱

              生長特性

              貨號

              非洲綠猴腎細胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7

              貼壁生長

              EY-X63661

              ?
              細胞名稱  非洲綠猴腎細胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7
              形態特性: 上皮樣細胞

              生長特性: 貼壁生長

              特征特性: Vero-HCV-P7細胞整合有丙型肝炎病毒的P7基因,能穩定表達P7蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室于2008年構建并保存。

              培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

              傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

              傳代情況: C23

              凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

              支原體檢測: 陰性
              冷凍保存細胞之方法
              冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
              冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
              實驗報告:
              一、分離與培養:
              1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
              2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
              3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
              4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
              5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
              二、免疫熒光鑒定:
              1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
              2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
              3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
              4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
              5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
              6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
              操作步驟:
              1、貼壁細胞的消化
              ①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
              ②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
              ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
              化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
              ④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
              ⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
              2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
              Indole-3-acrylic acid methyl ester

              CAS No.:19626-92-7

              中文名:

              分子式:C12H11NO2

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              非洲綠猴腎細胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7麥康凱瓊脂規格:250g用途:用于腸道致病菌的選擇性分離、培養

              CC瓊脂添加劑規格:1ml*5支用途:每支添加于90mlCC瓊脂基礎中

              藥敏紙片規格:30ug/片,20片/瓶用途:用于藥物體外敏感性試驗

              大豆酪蛋白消化物培養基(USP)顆粒規格:250g用途:用于藥品的無菌檢測

              牛奶培養基規格:250g用途:用于乳菌凝固力及乳鑒別試驗

              無菌采樣袋(12cm*18cm)(帶壓條)規格:100個/包用途:用于樣品的采樣(小號采樣袋)

              產品相關關鍵字: 非洲綠猴腎細胞 系/HCV-p7 Vero-HCV-p7
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