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              產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R
               
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              產品名稱:
              腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R
              產品型號:
              產品報價:
              產品特點:
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                腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R的詳細資料:

              公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

              產品名稱

              生長特性

              貨號

              腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R

              貼壁生長

              EY-X63409

              細胞名稱  腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R
              形態特性: 上皮樣

              生長特性: 貼壁生長

              特征特性: 該細胞系源于多能腎上腺皮質癌細胞系NCI-H295,后者由GazdarAF等建立,從腎上腺皮質的腫瘤中分離而來。NCI-H295細胞經改變培養條件獲得了NCI-295R細胞,群體倍增時間從原來的5天減為2天。NCI-295細胞懸浮生長,而NCI-H295R呈單層貼壁生長。NCI-H295R細胞保留了產生雄激素的能力,對血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應。

              培養條件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)Nu-SerumI,2.5%;15mMHEPES+0.00625mg/mlinsulin+0.00625mg/mltransferrin+6.25ng/mlselenium+1.25mg/mlbovineserumalbumin+0.00535mg/mllinoleicacid

              傳代方法: 1:3~1:4傳代;每周換液2~3次。

              傳代情況: C3

              凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

              支原體檢測: 培養法(-)
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              冷凍保存細胞之方法
              冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
              冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
              實驗要點及說明:
              1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
              2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
              3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
              4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
              5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
              實驗報告:
              一、分離與培養:
              1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
              2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
              3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
              4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
              5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
              二、免疫熒光鑒定:
              1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
              2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
              3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
              4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
              5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
              6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
              雜交瘤細胞株;Fi-14F1形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-DMP1 Polyclonal Antibody

              雜交瘤細胞株;2B5形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-SLC30A2 Polyclonal Antibody

              雜交瘤細胞株;1D7形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-NRBF2 Polyclonal Antibody

              雜交瘤細胞株;4B7形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-CASP1 Polyclonal Antibody

              GY-PCV2-PK15細胞株;GY-PCV2-PK15形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Alexa Fluor 488標記的羊抗豚鼠IgG

              雜交瘤細胞株;8F9H3形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-MYH1 Polyclonal Antibody

              抗人CD146雜交瘤細胞株;4-F10(IgG1)形態特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長PE-CY5標記的小鼠抗兔IgM

              雜交瘤細胞株;5B8形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長辣根過氧化物酶標記的小鼠抗大鼠IgG

              雜交瘤細胞株;5D9形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Alexa Fluor 488標記的羊抗小鼠IgG

              雜交瘤細胞株;8H7形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-YY1AP1 Polyclonal Antibody

              雜交瘤細胞株;STMN1-3P9形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-SOCS2 Polyclonal Antibody

              雜交瘤細胞株;P24-3B9形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-Epsilon Tubulin  Monoclonal Antibody

              雜交瘤細胞株;P24-2F4形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長PE-Cy3標記的兔抗羊IgM

              雜交瘤細胞株;NGAL-4F6形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-NKAP Polyclonal Antibody

              雜交瘤細胞株;NGAL-3B5形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-LIG4 Polyclonal Antibody

              雜交瘤細胞株;1A4形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長PE標記的兔抗豚鼠IgM
              腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒ICAELISAKit產品規格:48T/96T。

              兔子白介素2(IL-2)ELISA試劑盒ICAM-1/CD54ELISAKit產品規格:48T/96T。

              兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒ICAM-1/CD54ELISAKit產品規格:48T/96T。

              兔纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒ICAM-1ELISAKIT產品規格:48T/96T。

              兔抗內皮細胞抗體(AECA)ELISA試劑盒ICAM-1ELISAKit產品規格:48T/96T。

              兔抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒ICAM-1ELISAKit產品規格:48T/96T。

              兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒ICAM-2ELISAKit產品規格:48T/96T。

              兔抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒ICAM-2ELISAKit產品規格:48T/96T。
              操作步驟:
              1、貼壁細胞的消化
              ①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
              ②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
              ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
              化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
              ④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
              ⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
              2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

               

              產品相關關鍵字: 腎上腺皮質 NCI-H295R
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